Olink檢測(cè)樣本采集操作流程（血清）
Olink檢測(cè)樣本采集操作流程（血清）
1. 目的
針對(duì)Olink蛋白組檢測(cè)，規(guī)范血清樣本采集和制備操作流程。
2. 適用范圍
本指南適用于從全血中分離血清樣本。
3. 定義和術(shù)語(yǔ)
3.1血清
血清（Serum）是血液從體內(nèi)取出后發(fā)生凝血后的上層澄清液體，凝血的主要反應(yīng)是纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，所以血清中不再含有纖維蛋白原。而血漿（Plasma）含有纖維蛋白原。
4. 設(shè)備和器材
4.1個(gè)人防護(hù)裝備
手套、口罩、實(shí)驗(yàn)防護(hù)服、護(hù)目鏡及其它相關(guān)防護(hù)裝備。
4.2 容器
血清采血管（紅色管蓋），離心管（無(wú)菌消毒）。
4.3 儀器設(shè)備
與離心管配套的離心機(jī)。
移液器及無(wú)菌槍頭。
5. 主要流程
5.1 采血
使用貼好標(biāo)簽血清采血管，配合一次性消毒采血針作靜脈穿刺，采血管內(nèi)的負(fù)壓使血液自動(dòng)吸入管中，當(dāng)收集的血液達(dá)到2ml時(shí)停止采血，拔出針頭后只要將采血管輕輕顛倒5-8次混勻即可。
5.2分離血清
5.2.1 放置：采血管室溫正置30分鐘~60分鐘，使血液充分凝聚。
5.2.2 離心：采血管凝血后進(jìn)行離心分離血清，離心條件：室溫，離心力1000~1500xg，離心10分鐘，離心后上清轉(zhuǎn)移至1.5mL離心管中。
5.2.3 二次離心：裝有上清的離心管再次離心，離心條件：室溫，離心力 1500~2000xg，離心2分鐘，取上清液。
5.2.4分裝：把離心后的上清液分裝至1.5ml離心管中，根據(jù)檢測(cè)的目的，分裝成幾份，其中用于Olink檢測(cè)的血清分裝量為100μl。
5.3 樣本保存
凍存：血清分裝后應(yīng)立即儲(chǔ)存在-80℃冰箱中。
5.4 樣本運(yùn)輸
冷鏈運(yùn)輸。凍存的血清從冰箱中取出后應(yīng)立即至于以干冰為冷媒的運(yùn)輸箱中，并保障到達(dá)運(yùn)輸目的地后還有剩余干冰，或者采用運(yùn)輸過(guò)程中有持續(xù)溫度監(jiān)控的運(yùn)輸方式確保樣本持續(xù)保持低溫。
6 注意事項(xiàng)
6.1 同一項(xiàng)目中的樣本類型應(yīng)保持一致（血清，血漿不能混用），以使數(shù)據(jù)具有可比性。
6.2 同一項(xiàng)目應(yīng)使用同一種類型采血管，比如統(tǒng)一采用同一品牌同一批次血清采血管。
6.3 可能的情況下，盡量采用不加促凝劑的血清采血管（紅色管蓋），但含有促凝劑的采血管（黃色管蓋）也可以使用。
6.4 同一項(xiàng)目的樣本采集，除操作方法一致外，操作時(shí)間，人員，儀器應(yīng)盡量一致，如采血后到離心的靜置時(shí)間、血清樣本離心條件等。
6.5 樣本儲(chǔ)存條件應(yīng)盡量一致，如設(shè)置溫度、時(shí)間、凍融次數(shù)（盡量避免）等。
6.6 項(xiàng)目開(kāi)始時(shí)，需要提前確認(rèn)樣本編號(hào)規(guī)則，便于現(xiàn)場(chǎng)操作標(biāo)記和管理。
6.7 所有的采血管，離心管應(yīng)在使用前貼好標(biāo)簽，做好標(biāo)記，以防樣本混淆。其中涉及到低溫保存部分的保存管，離心管使用的標(biāo)簽必須是抗低溫的。
6.8分離的血清外觀應(yīng)黃色透明，無(wú)溶血、無(wú)可見(jiàn)異物，無(wú)異常。對(duì)于溶血，并不影響olink的檢測(cè)，但可能會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度。
6.10長(zhǎng)期保存需讓樣本保存在-80℃或更低，如中途凍融應(yīng)保障每個(gè)樣本的凍融次數(shù)一致，以避免凍融次數(shù)不同引入的樣本差異。生物樣本庫(kù)應(yīng)提供每個(gè)樣本狀態(tài)數(shù)據(jù)跟蹤，并避免無(wú)謂的凍融。
6.11 一般而言樣本在-80°C冰箱可以長(zhǎng)期保存，樣本也可以放置于液氮中，但在液氮保存的樣本應(yīng)采用帶螺口的低溫樣本保存管。
