Olink檢測樣本采集操作流程（血漿）
Olink檢測樣本采集操作流程（血漿）
1. 目的
針對Olink蛋白組檢測，規(guī)范血漿樣本采集和制備操作流程。
2. 適用范圍
本指南適用于從使用抗凝劑的全血中分離血漿樣本。
3. 定義和術(shù)語
3.1 血漿
血漿（Plasma）是指離開血管的全血經(jīng)抗凝處理后，通過離心沉淀，所獲得的不含細(xì)胞成分的液體，和血清（Serum）相比，其中含有纖維蛋白原。
4. 設(shè)備和器材
4.1 個人防護裝備
手套、口罩、實驗防護服、護目鏡及其它相關(guān)防護裝備。
4.2 容器
EDTA抗凝采血管（紫色管蓋），離心管（無菌消毒）。
4.3 儀器設(shè)備
與離心管配套的高速冷凍離心機（離心力可達(dá)2000g）。
移液器及無菌槍頭。
5. 主要流程
5.1 采血
使用貼好標(biāo)簽的EDTA采血管，配合一次性消毒采血針作靜脈穿刺，采血管內(nèi)的負(fù)壓使血液自動吸入管中，當(dāng)收集的血液達(dá)到2ml時停止采血，采血管本身含有EDTA抗凝劑，拔出針頭后只要將采血管輕輕顛倒8-10次混勻即可。
5.2血漿分離
5.2.1離心：2ml全血采集至EDTA抗凝管后通過離心分離血漿，離心條件為：離心力400~800g，時間10分鐘，溫度為4℃。
5.2.2轉(zhuǎn)移：離心后上部清液為血漿，用移液器取上部清液血漿至離心管中。
5.2.3二次離心：把裝有血漿的離心管進(jìn)行二次離心，離心條件為：離心力2000g，時間10分鐘，溫度為4℃。血漿進(jìn)行二次離心的目的是為了去除所有的細(xì)胞碎片等成分。
5.2.4分裝：把離心后的上清液分裝至1.5ml離心管中，根據(jù)檢測的目的，分裝成幾份，其中用于Olink檢測的血漿分裝量為100μl。
5.3 樣本保存
凍存：血漿分裝后應(yīng)立即儲存在-80℃冰箱中。
5.4 樣本運輸
冷鏈運輸。凍存的血漿從冰箱中取出后應(yīng)立即至于以干冰為冷媒的運輸箱中，并保障到達(dá)運輸目的地后還有剩余干冰，或者采用運輸過程中有持續(xù)溫度監(jiān)控的運輸方式確保樣本持續(xù)保持低溫。
6 注意事項
6.1 同一項目中的樣本類型應(yīng)保持一致（血漿，血清不能混用），以使數(shù)據(jù)具有可比性。
6.2 同一項目應(yīng)使用同一種類型采血管，比如統(tǒng)一采用同一品牌同一批次EDTA抗凝管。其他的抗凝劑如檸檬酸鈉，肝素鈉等也可以用于olink檢測，但首選EDTA。
6.3 同一項目的樣本采集，除操作方法一致外，操作時間，人員，儀器應(yīng)盡量一致，如采血后到離心的間隔時間、血漿樣本離心條件等。
6.4 樣本儲存條件應(yīng)盡量一致，如設(shè)置溫度、時間、凍融次數(shù)（盡量避免）等。
6.5 項目開始時，需要提前確認(rèn)樣本編號規(guī)則，便于現(xiàn)場操作標(biāo)記和管理。
6.6 所有的采血管，離心管應(yīng)在使用前貼好標(biāo)簽，做好標(biāo)記，以防樣本混淆。其中涉及到低溫保存部分的保存管，離心管使用的標(biāo)簽必須是耐低溫標(biāo)簽。
6.7全血采集到抗凝管后應(yīng)盡快離心分離，若不能立即分離，在離心分離前室溫（22℃）放置不應(yīng)超過 1 小時或4°C 放置不應(yīng)超過 8 小時。
6.8分離的血漿外觀應(yīng)淡黃色或黃色，無溶血、無乳糜、無可見異物，無異常。對于溶血，并不影響Olink蛋白組實驗的檢測，但可能會影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度。
6.9離心機使用時應(yīng)注意安全，保持離心機的平衡，且離心機應(yīng)先預(yù)冷，使離心溫度保持4℃。對第一次和第二次離心后的試管都要輕拿輕放，避免擾動。
6.10長期保存需讓樣本保存在-80℃或更低，如中途凍融應(yīng)保障每個樣本的凍融次數(shù)一致，以避免凍融次數(shù)不同引入的樣本差異。生物樣本庫應(yīng)提供每個樣本狀態(tài)數(shù)據(jù)跟蹤，并避免無謂的凍融。
6.11一般而言樣本在-80°C冰箱可以長期保存，樣本也可以放置于液氮中，但在液氮保存的樣本應(yīng)采用帶螺口的低溫樣本保存管，防止炸裂。
